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氨基甲烷缓冲液

(2018-08-21 17:10:42) 百科
氨基甲烷缓冲液

氨基甲烷缓冲液

氨基甲烷缓冲液是中化学製剂,氨基甲烷缓冲液不仅被广泛用作核酸和蛋白质的溶剂,还有许多重要用途。三羟甲基氨基甲烷被用于不同pH条件下的蛋白质晶体生长。三羟甲基氨基甲烷缓冲液的低离子强度特点可用于线虫核纤层蛋白的中间纤维的形成。

基本介绍

  • 中文名:氨基甲烷缓冲液
  • 英文名:aminomethane
  • 化学式:(HOCH2)3CNH2
  • 套用领域:生物化学和分子生物学

定义

三羟甲基氨基甲烷(tris(hydroxymethyl)aminomethane,一般简称为Tris)是一种有机化合物,其分子式为(HOCH2)3CNH2。Tris被广泛套用于生物化学和分子生物学实验中的缓冲液的製备。例如,在生物化学实验中常用的TAE和TBE缓冲液(用于核酸的溶解)都需要用到Tris。由于它含有氨基,因此可以与醛发生缩合反应。
氨基甲烷缓冲液

缓冲特性

Tris为弱硷,在室温(25℃)下,它的pKa为8.1;根据缓冲理论,Tris缓冲液的有效缓冲範围在pH7.0到9.2之间。
Tris硷的水溶液pH在10.5左右,一般加入盐酸以调节pH值至所需值,即可获得该pH值的缓冲液。但同时应注意温度对于Tris的pKa的影响。 不同温度下Tris的pKa(0.1M)
温度(℃)
0
20
25
37
pKa
8.76
8.20
8.06
7.72
衍生缓冲液由于Tris缓冲液为弱硷性溶液,DNA在这样的溶液中会被去质子化,从而提高其溶解性。人们常常在Tris盐酸缓冲液中加入EDTA製成“TE缓冲液”,TE缓冲液被用于DNA的稳定和储存。如果将调节pH值的酸溶液换成乙酸,则获得“TAE缓冲液”(Tris/Acetate/EDTA),而换成硼酸则获得“TBE缓冲液”(Tris/Borate/EDTA)。这两种缓冲液通常用于核酸电泳实验中。

製备

Tris可以由两步反应生成:先由硝基甲烷生成过渡态(HOCH2)3CNO2,然后再由过渡态还原得到Tris。

用途

Tris缓冲液不仅被广泛用作核酸和蛋白质的溶剂,还有许多重要用途。Tris被用于不同pH条件下的蛋白质晶体生长。Tris缓冲液的低离子强度特点可用于线虫(C.elegans)核纤层蛋白(lamin)的中间纤维的形成。Tris也是蛋白质电泳缓冲液的主要成分之一。此外,Tris还是製备表面活性剂、硫化促进剂和一些药物的中间物。Tris也被用作滴定标準物。

参考文献

1. ^Gomori,G.,PreparationofBuffersforUseinEnzymeStudies.MethodsEnzymology.,1,138-146(1955).
2. ^SheldonB.Markofsky“NitroCompounds,Aliphatic”Ullmann'sEncyclopediaofIndustrialChemistry2002byWiley-VCH,Wienheim,2002.DOI:10.1002/14356007.a17_401.
3. ^Campos,A.,etal.,CrystallizationandpreliminaryX-rayanalysisofFlhDfromEscherichiacoli.J.Struct.Biol.,123(3),269-271(1988).
4. ^KarabinosA,SchünemannJ,MeyerM,AebiU,WeberK,ThesinglenuclearlaminofCaenorhabditiselegansformsinvitrostableintermediatefilamentsandparacrystalswithareducedaxialperiodicity.JMolBiol,325(2):241-247(2003).
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